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荧光标记

荧光染料是生物分子标记的重要工具。荧光素衍生物可被广泛地标记在那些用于荧光显微镜、流式细胞仪和免疫荧光检测等领域的试剂上。通常,生物素、FITC等染料可任意标记在多肽N端或C端。但我们推荐N端标记,其成功率更高、所需时间更短、更易操作。由于多肽都是从C端往N端合成,所以N端修饰将是固相合成的最后一步,不再需要额外的偶联步骤。相反,如果是C端标记,则需要附加步骤,而过程会更复杂。

     

普通荧光修饰

荧光修饰中文名称N端N端带有linker
生物素标记多肽Biotin-Biotin-Ahx-
异硫氰酸荧光素FITC-FITC-Ahx-  
5-羧基荧光素5-FAM-5-FAM-Ahx-
丹磺酰荧光素Dansyl-Dansyl-Ahx-
5-羧基四甲基罗丹明TMR-  (TAMRA-)TMR-Ahx-  (TAMRA-Ahx-)

 
通过Lys侧链氨基连接的荧光修饰

多肽N端多肽序列中间多肽C端
Lys(Biotin)- -Lys(Biotin)- -Lys(Biotin)
Lys(FITC)- -Lys(FITC)- -Lys(FITC)
Lys(5-FAM)- -Lys(5-FAM)- -Lys(5-FAM)
Lys(Dansyl)- -Lys(Dansyl)- -Lys(Dansyl)
Lys(TMR)- -Lys(TMR)- -Lys(TMR)
Lys(Dnp)- -Lys(Dnp)- -Lys(Dnp)

 
我司常做的荧光物质的激发光波长和发射光波长

荧光基团Ex(nm)Em(nm)荧光基团Ex(nm)Em(nm)
羟基香豆素325386R-phycoerythrin (PE) (489)565578
丹磺酰氯340578Rhodamine Red-X560580
AMC345445Tamara565580
甲氧基香豆素360410Alexa fluor 555556573
Alexa fluor 系列345442Alexa fluor 546556573
氨基香豆素350445Rox575602
Dabcyl453-Alexa fluor 568578603
Cy2490510Texas Red589615
FAM495517Alexa fluor 594590617
Alexa fluor 488494517Alexa fluor621639
FITC495519Alexa fluor 633650668
Alexa fluor 430430545Cy5 (625)650670
5-FAM492518Alexa fluor 660663690
Alexa fluor 532530555Cy5.5675694
HEX535556TruRed490; 675695
5-TAMRA542568Alexa fluor 680679702
Cy3550570Cy7743767
TRITC547572Cy3.5581596



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